免疫熒光層析法又叫

博禾醫生
免疫熒光層析法又叫熒光免疫層析法,是一種結合了免疫層析技術(shù)與熒光標記技術(shù)的快速檢測方法。
熒光免疫層析法以硝酸纖維素膜為載體,通過(guò)毛細作用使待測樣本在層析條上移動(dòng)。樣本中的目標物與熒光標記的抗體結合后,在檢測線(xiàn)處被固定抗體捕獲形成復合物,激發(fā)光照射后產(chǎn)生熒光信號。該技術(shù)利用抗原抗體特異性反應實(shí)現定性或定量檢測,靈敏度高于傳統膠體金層析法。
常用熒光標記物包括量子點(diǎn)、稀土熒光微球等納米材料。這些標記物具有斯托克斯位移大、抗光漂白性強等特點(diǎn),可通過(guò)便攜式熒光讀數儀實(shí)現信號量化。標記抗體時(shí)需保持其生物活性,通常采用EDC/NHS活化羧基偶聯(lián)法。
該方法廣泛應用于傳染病檢測如流感抗原篩查、妊娠檢測、心肌標志物檢測等即時(shí)檢驗場(chǎng)景。在新冠疫情期間,采用該技術(shù)的抗原檢測試劑盒因操作簡(jiǎn)便、15分鐘內出結果而被廣泛使用。
相比膠體金法,其檢測靈敏度可提升10-100倍,檢測限可達pg/mL級別。內置質(zhì)控線(xiàn)可驗證檢測有效性,部分產(chǎn)品配合智能終端可實(shí)現結果數字化判讀,減少人為誤差。
典型操作包括樣本加樣、層析反應、信號讀取三步。檢測時(shí)需注意樣本量控制、環(huán)境溫度影響及結果判讀時(shí)間。部分高敏產(chǎn)品需要專(zhuān)用熒光分析儀進(jìn)行定量檢測。
使用熒光免疫層析試劑時(shí)應注意檢查有效期,避免反復凍干標記抗體。儲存時(shí)應避光防潮,檢測前平衡至室溫。對于臨界值結果建議復檢或采用其他方法驗證,特殊人群檢測需結合臨床表現綜合判斷。
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