血型正反定型操作步驟是什么
關(guān)鍵詞：#血型
血型正反定型操作步驟主要包括樣本采集、試劑準備、正向定型、反向定型、結果判讀五個(gè)環(huán)節。
1、樣本采集：
采集受檢者靜脈血2-3毫升置于抗凝管中，離心分離紅細胞與血清。紅細胞用生理鹽水洗滌3次配制成3%-5%懸液，血清需56℃水浴30分鐘滅活補體。操作需在生物安全柜中進(jìn)行，避免樣本污染。
2、試劑準備：
準備抗A、抗B單克隆抗體試劑及A型、B型標準紅細胞。試劑需平衡至室溫，標準紅細胞需用生理鹽水洗滌后新鮮配制。檢查試劑有效期及外觀(guān)，出現沉淀或渾濁需更換。
3、正向定型：
在標記好的玻片或微孔板中分別加入抗A、抗B試劑各1滴，對應加入受檢者紅細胞懸液1滴，混勻后室溫靜置10分鐘。1000rpm離心1分鐘觀(guān)察凝集反應，出現顆粒狀凝集為陽(yáng)性結果。
4、反向定型：
將受檢者血清與A型、B型標準紅細胞各1滴在玻片上混合，室溫靜置15分鐘后離心。血清中存在對應抗體時(shí)會(huì )出現紅細胞凝集，如A型血清應凝集B型紅細胞。
5、結果判讀：
正向定型顯示紅細胞抗原，反向定型驗證血清抗體，兩者結果需相互印證。出現不符時(shí)需重復試驗，必要時(shí)采用試管法或分子生物學(xué)方法復核。記錄凝集強度（1+至4+），最終出具規范報告。
操作全程需佩戴防護裝備，嚴格執行無(wú)菌操作規范。實(shí)驗前后需用75%酒精擦拭臺面，廢棄標本需高壓滅菌處理。定期參加室間質(zhì)評保證檢測準確性，發(fā)現ABO亞型或特殊血型應送上級實(shí)驗室確認。建議醫療機構每季度對操作人員進(jìn)行標準化培訓，確保血型鑒定結果可靠。
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