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基因測序是什么原理？

患者：男，33歲 提問(wèn)于2018-12-15 13:30

病情描述:
測取基因的順序用的是基因測序，它的原理是什么？
共2個(gè)回答
夏廷毅 主任醫師 去掛號
北京華信醫院 三級 放療科
DNA測序的方法有很多種，目前最常見(jiàn)的是雙脫氧終止法了。在測序用的緩沖液中含有四種dNTP及聚合酶，測序時(shí)分成四個(gè)反應，每個(gè)反應除上述成分外分別加入2,3-雙脫氧的A、C、G，T核苷三磷酸(稱(chēng)為ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTP)，然后進(jìn)行聚合反應。在第一個(gè)反應物中，ddATP會(huì )隨機地代替dATP參加反應一旦ddATP加入了新合成的DNA鏈，由于其3位的羥基變成了氫，所以不能繼續延伸。所以第一個(gè)反應中所產(chǎn)生的DNA鏈都是到A就終止了。同理第二個(gè)反應產(chǎn)生的都是以C結尾的，第三個(gè)反應的都以G結尾，第四個(gè)反應的都以T結尾, 電泳后就可以讀出序列了。
張鞾 副主任醫師 去掛號
江蘇省中西醫結合醫院 三甲 腫瘤科
這個(gè)測序法，加了四種材料進(jìn)去，ddT、ddA、ddG、ddC，能和原始的DNA序列配對，但因特殊的結構，導致復制終止。測定過(guò)程中，將待測樣品分為4份，每份中加入一樣改變后的材料。結束后，第一份中所有片段全是以ddT為終端的不同長(cháng)度的序列，以此類(lèi)推形成了長(cháng)度不同，可以分辨出長(cháng)短不同的序列，然后在看看這個(gè)序列對應的添加的材料是哪一種，就能按照序列的長(cháng)短來(lái)確定相應的脫氧核苷酸了。
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